嘔吐毒素的檢測(cè)方法與作用機(jī)制

^{脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin)，主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。}



 

^{DON的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)，據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON于1972年由日本的Morooka等分離，同年，Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu)，并將其命名為4-deoxynivalenol(DON) 。}

 

^{DON廣泛存在于，主要污染小麥、大麥、玉米等谷類作物，也污染糧食制品，人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。另外，它還常與其它的霉鹵毒素如黃曲mei毒素共同污染農(nóng)作物，進(jìn)入人體后可以相互影響。近年來發(fā)現(xiàn)DON可能與人類食管癌、IGA腎bing有關(guān)，對(duì)人類及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物，研究表明，DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積，但無特殊的靶器官，具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后，會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡，但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一，豬是敏感的動(dòng)物。研究表明，DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用，可能有遺傳毒性，但無致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重，引起了各國的普遍重視。}



 

^{有調(diào)查顯示：}

 

^{中國飼料和原料霉菌毒素污染超標(biāo)的比例為60%—70%，其中嘔吐毒素的超標(biāo)比例接近70%，被檢的玉米、麩皮和DDGS樣品中嘔吐毒素的檢出率均高達(dá)90%以上，分別為92.9%、92.3%和100%。}

 

^{豆粕的檢出率較低為54.5%。}

 

^{麩皮和豆粕中嘔吐毒素未見超標(biāo)，其平均含量為0.44mg/kg和0.05mg/kg，屬于輕度污染。}

 

^{玉米嘔吐毒素的超標(biāo)率為57.1%，毒素平均含量為1.01mg/kg，其中*含量為2.13mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{DDGS中嘔吐毒素的超標(biāo)率為88.2%，毒素平均含量為1.36mg/kg，低含量為0.85mg/kg，*含量為1.72mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{玉米和DDGS中嘔吐毒素的平均含量極顯著高于麩皮和豆粕（P＜0.01），DDGS中嘔吐毒素的平均含量顯著高于玉米（P＜0.05），麩皮中嘔吐毒素的平局你含量極顯著高于豆粕（P＜0.01）。}

 

^{被檢配合飼料中嘔吐毒素的檢出率為97.4%，仔豬料、中豬料、妊娠母豬料和哺乳母豬料的檢出率高達(dá)100%。}

 

^{其中，乳豬料嘔吐毒素未見超標(biāo)，其平均含量為0.28mg/kg，顯著低于其他種類全價(jià)料（P＜0.05），屬于輕度污染。仔豬料、中豬料、大豬料、妊娠豬料和哺乳豬料均有不同程度的超標(biāo)，超標(biāo)率為14.3%、14.3%、22.2%、10.0%和23.1%，其*含量分別為2.31、1.14、1.44、1.45mg/kg和1.52mg/kg，屬于中度污染。}

 

^{“嘔吐毒素”不怕高溫126℃下加熱90分鐘仍有毒性。}

 

^{蠟樣芽孢桿菌是一種在顯微鏡下看起來形狀像蠟一樣的革蘭染色陽性桿菌，在自然界廣泛存在，是引起食物中毒的常見細(xì)菌，與臭名昭著的炭疽桿菌是“同族兄弟”。}

 

^{蠟樣芽孢桿菌很狡猾，在生長(zhǎng)條件不好的情況下會(huì)產(chǎn)生一種被稱為“芽孢”的“外殼”，把自己保護(hù)起來，避免死亡。因此，蠟樣芽孢桿菌比其它細(xì)菌更耐熱，常常在加熱的條件下也不會(huì)死亡。}

 

^{上世紀(jì)70年代以前，人們并未注意到蠟樣芽孢桿菌對(duì)人類健康的影響，以為只是一種自然界常見的非致病菌。但實(shí)際上，早在1937年就有人從病人的血液中分離到了這種細(xì)菌；上世紀(jì)50年代，挪威醫(yī)生首先報(bào)告了蠟樣芽孢桿菌引起的4起食物中毒事件，涉及600多人。后來，英國、日本、印度、澳大利亞、美國等地相繼發(fā)現(xiàn)蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒，我國于1973年報(bào)道蠟樣芽孢桿菌相關(guān)病例。近年來，蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒事件逐漸增多。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1986年-2007年僅在我國文獻(xiàn)報(bào)道中的蠟樣芽孢桿菌食物中毒事件就有299起，甚至有導(dǎo)致死亡的病例發(fā)生。}

 

^{“米”家族易被盯上}

 

^{蠟樣芽孢桿菌釋放何種毒素與細(xì)菌的類型和生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。有研究證實(shí)，血清1型蠟樣芽孢桿菌容易釋放嘔吐毒素；在米飯等淀粉類食物中，蠟樣芽孢桿菌容易產(chǎn)生嘔吐毒素，而在肉類等其它食品中，嘔吐毒素產(chǎn)生較少，而腸毒素增多。}



 

^{一般來說，壞了的食品總是有異味，大家聞一聞就知道能不能吃，但蠟樣芽孢桿菌“放毒”特別隱蔽，含有毒素的食品大多無腐*、變質(zhì)現(xiàn)象，進(jìn)食時(shí)不易被人們察覺。蠟樣芽孢桿菌食物中毒主要發(fā)生在夏季，在我國主要發(fā)生在6-9月。食物中毒的臨床表現(xiàn)有兩種類型：嘔吐型和腹瀉型。我國以嘔吐型多見，約占蠟樣芽孢桿菌食物中毒的76%，而歐美等西方國家以腹瀉型多見。這可能與我國的飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)。}

 

^{嘔吐型的蠟樣芽孢桿菌食物中毒潛伏期短，一般在進(jìn)食后0.5-6小時(shí)發(fā)生，主要表現(xiàn)為惡心、嘔吐，伴有乏力、低熱等癥狀，很少出現(xiàn)腹瀉。大多數(shù)病情較輕，24小時(shí)內(nèi)可以自愈，但嚴(yán)重的可能引起肝衰竭、代謝性酸中毒、心肌或中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，甚至導(dǎo)致死亡。引起嘔吐型食物中毒的主要食品是米飯及其制品(80%以上)，如：米飯、炒飯、稀飯、米糕、米粉皮、米線等；涼面、豆腐也可以引發(fā)。}

 

^{腹瀉型食物中毒較少見，中毒的原因是蠟樣芽孢桿菌腸毒素。潛伏期較長(zhǎng)，一般在進(jìn)食后6-15小時(shí)發(fā)生，臨床表現(xiàn)主要是水樣腹瀉和腹痛，很少伴有嘔吐癥狀。大多數(shù)在腹瀉數(shù)次后癥狀逐漸減輕，1天左右好轉(zhuǎn)。嚴(yán)重者可引起電解質(zhì)紊亂、出血性腹瀉。引起腹瀉型食物中毒的食品較復(fù)雜，糧食、肉類、乳類食品均可引發(fā)，其中盒飯類混合食品較多見，可能是在分裝的過程中污染所致。}

 

^{嘔吐毒素檢測(cè)方法：}

 

^{1、膠體金定性卡法：}

^{是嘔吐毒素簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法，檢測(cè)不需要配套儀器，樣品處理簡(jiǎn)單，五到十分鐘就可以看到檢測(cè)結(jié)果?？梢愿鶕?jù)G、T線，初步確定所測(cè)樣本毒素含量范圍，但不能給出具體數(shù)值。價(jià)*低、沒有國標(biāo)支持，適合企業(yè)初檢使用。}



 

^{2、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法：}

^{依據(jù)該方法開發(fā)出來的嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒，可以半定量的檢測(cè)樣品中嘔吐毒素的含量，目前國產(chǎn)試劑盒大量上市，價(jià)*}適中，有國標(biāo)支持，適合中小型企業(yè)質(zhì)量控制，或者作為產(chǎn)品初步質(zhì)量控制。



 

^{3、免疫親和柱為分離手段：用液相色譜儀作為檢測(cè)工具的分析方法。該項(xiàng)技術(shù)靈敏度高，測(cè)定范圍廣泛，采用單克隆免疫技術(shù)，可以性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強(qiáng)，有國標(biāo)支持。檢測(cè)成本高，儀器維護(hù)成本高。一般作為檢測(cè)機(jī)構(gòu)終端判定方法，也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。}



 

^{4、膠體金定量分析卡法：是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法，靈敏度高、結(jié)果可靠，可以和親和柱方法相媲美，檢測(cè)價(jià)*適中；有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持。適合中大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制。}



 

^{5、液相或氣相串聯(lián)質(zhì)譜法：一般作為實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法，主要作為研究或者國家部門對(duì)毒素情況監(jiān)測(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。}